光散射粒徑譜儀利用光在傳播中遇到顆粒時產生的衍射和散射現(xiàn)象,衍射和散射的光能強度與顆粒的尺度有關,通過測量這些光能強度來確定顆粒的粒徑,廣泛應用于材料科學、化學工程、環(huán)境監(jiān)測等領域。
光散射粒徑譜儀主要依賴以下三種物理機制進行測量:
1.動態(tài)光散射(DLS)
適用對象:納米級顆粒(0.3nm-0µm),如蛋白質、病毒、膠束、納米藥物。
原理:通過檢測懸浮粒子因布朗運動引起的散射光強波動,利用自相關函數(shù)分析計算出粒子的擴散系數(shù),再根據斯托克斯-愛因斯坦方程推導出流體力學半徑。
特點:速度快(單次測量1-5分鐘)、適合高通量篩選,是生物制藥中蛋白聚集監(jiān)測的“金標準”。
2.靜態(tài)光散射(SLS)
適用對象:大分子體系,如聚合物、抗體、病毒樣顆粒(VLP)。
原理:測量多角度散射光強,結合Zimm作圖法或Berry擬合,直接測定重均分子量、回轉半徑和第二維里系數(shù)。
優(yōu)勢:無需標準曲線,可獲得絕對分子量,常用于基因治療載體表征。
3.激光衍射法(LD)
適用對象:微米級顆粒(0.02-3600µm),如粉體、乳液、漿料。
原理:依據米氏散射或夫瑯禾費衍射理論,通過多元探測器接收不同角度的散射光信號,反演計算粒度分布。
特點:測量范圍寬、重復性高(誤差≤±0.5%),支持濕法與干法分散。
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