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277次Topoisomerase I 來源于牛痘病毒(vaccinia virus), 通過基因重組方案制備純化。其能解旋DNA的超螺旋結(jié)構(gòu), 除此外其能識(shí)別并切割雙鏈DNA末端 [5’C(T)CCTT↓],并 且與DNA形成共價(jià)連接形成穩(wěn)定復(fù)合物。該共價(jià)復(fù)合物遇 到DNA的5’-OH基團(tuán)后,重新連接形成完整DNA鏈。因此, 使用該酶可作為DNA連接的有效工具,可用于DNA的載體 連接(TOPO克隆載體制備)、接頭連接(NGS建庫(kù))等實(shí) 驗(yàn)。
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