在生命科學(xué)研究的前沿賽道上,總有一些“黃金組合"持續(xù)霸占國自然立項(xiàng)清單,外泌體與miRNA的搭配正是其中的jiao佼者。從基礎(chǔ)科研到臨床轉(zhuǎn)化,這對“生命信使"的身影無處不在,而2023版MISEV指南的發(fā)布,更讓相關(guān)研究走向標(biāo)準(zhǔn)化、精準(zhǔn)化的新階段。今天,我們就來深度解析這一研究熱點(diǎn),同時(shí)為你奉上覆蓋全流程的研究解決方案。
圖1 EVs在不同疾病中的應(yīng)用
一、國自然熱點(diǎn)解析:外泌體+miRNA為何“炙手可熱"?
2013年與2024年的諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng),分別頒給細(xì)胞外囊泡(EVs)與miRNA的突破性研究。二者的關(guān)聯(lián)緊密到堪稱 “諾貝爾獎(jiǎng)級套娃"—— 若把外泌體比作穿梭于生物體內(nèi)的 “精準(zhǔn)快遞員",miRNAs 便是這份快遞中承載著生命調(diào)控指令的核心 “貨物"。
圖2 2013年,細(xì)胞內(nèi)部囊泡運(yùn)輸調(diào)控機(jī)制獲“諾貝爾生理或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)"
近年來,外泌體&miRNA的研究方向不斷拓展,從基礎(chǔ)機(jī)制到臨床轉(zhuǎn)化,多個(gè)領(lǐng)域均是國自然資助的重點(diǎn):
? 跨界調(diào)控機(jī)制:如中國科學(xué)院動(dòng)物研究所崔峰團(tuán)隊(duì)的最新研究發(fā)現(xiàn),水稻外泌體可遞送miRNA至灰飛虱體內(nèi),通過靶向病毒和昆蟲基因調(diào)控病毒傳播穩(wěn)態(tài),這類跨物種細(xì)胞間通訊機(jī)制的研究,正成為基礎(chǔ)研究的新熱點(diǎn)。
? 疾病診療標(biāo)志物:外泌體包裹的miRNA具有組織特異性,且能穩(wěn)定存在于血液、唾液、尿液等生物體液中,在癌癥、心血管疾病、神經(jīng)退行性疾病等領(lǐng)域的早期診斷、預(yù)后評估中展現(xiàn)出巨大潛力。例如癌癥中異常表達(dá)的miR-21、let-7等,可通過外泌體在循環(huán)系統(tǒng)中穩(wěn)定存在,成為無創(chuàng)診斷的理想靶點(diǎn)。
? 靶向治療載體:外泌體作為miRNA的天然遞送載體,能保護(hù)miRNA免受核酸酶降解,同時(shí)借助其表面的整合素、四跨膜蛋白等實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)靶向遞送,解決了miRNA成藥過程中的穩(wěn)定性和靶向性難題,是目前基因治療領(lǐng)域的研究前沿。
二、研究標(biāo)準(zhǔn)化:MISEV2023指南核心要點(diǎn)解讀
隨著外泌體研究的快速發(fā)展,實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)化和可重復(fù)性成為關(guān)鍵問題。2023年,國際細(xì)胞囊泡學(xué)會(ISEV)發(fā)布了最新版的MISEV2023指南,為外泌體研究提供了全面的操作規(guī)范。
圖3 MISEV2023指南
其核心要點(diǎn)主要包括:
1. 明確命名規(guī)范:區(qū)分細(xì)胞外囊泡(EVs)與非囊泡細(xì)胞外顆粒,避免概念混淆,確保研究術(shù)語的統(tǒng)一性。
細(xì)胞外囊泡(extracellular vesicle,EV)泛指各類活細(xì)胞向細(xì)胞外釋放的納米級脂質(zhì)雙分子層囊泡,無法自我復(fù)制且不含功能性細(xì)胞核。MISEV2023建議使用通用術(shù)語“EV"指代各類囊泡亞群,或基于EV理化性質(zhì)(如大小、密度等)對EV亞群進(jìn)行命名。
EP: 細(xì)胞外顆粒; EV: 細(xì)胞外囊泡; SV: 合成囊泡; ACDV: 人工細(xì)胞衍生囊泡; NVEP: 非囊泡狀胞外顆粒
2. 優(yōu)化樣本處理:詳細(xì)規(guī)范了不同來源樣本(細(xì)胞培養(yǎng)物、生物體液、固體組織等)的收集與預(yù)處理方法,強(qiáng)調(diào)控制預(yù)分析變量對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。
3. 嚴(yán)格分離與表征要求:推薦采用多種方法聯(lián)合進(jìn)行外泌體的分離與濃縮,同時(shí)要求從形態(tài)、大小、表面標(biāo)志物等多維度進(jìn)行表征(不再滿足于單一標(biāo)志物檢測,要求從形態(tài)(電鏡)、粒徑(納米顆粒跟蹤分析NTA)、標(biāo)志物蛋白(CD9、CD63、CD81等)三個(gè)維度對外泌體進(jìn)行鑒定),確保研究對象的準(zhǔn)確性。

至少應(yīng)分析第1、2和3類中的至少一種蛋白質(zhì)作為EV標(biāo)志物,以評估EV制劑中NVEPs的存在情況
4. 新增功能研究章節(jié):補(bǔ)充了外泌體釋放與攝取機(jī)制、體內(nèi)研究方法等內(nèi)容,為功能驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)提供了標(biāo)準(zhǔn)化指導(dǎo)。
MISEV2023指南的核心目標(biāo)并非設(shè)置研究壁壘,而是通過標(biāo)準(zhǔn)化流程提升研究的嚴(yán)謹(jǐn)性和可重復(fù)性,助力外泌體研究從基礎(chǔ)科研向臨床轉(zhuǎn)化順利推進(jìn)。
三、愛必信全流程研究方案:從細(xì)胞培養(yǎng)到定量分析的一站式支持
外泌體+miRNA的研究流程復(fù)雜,涉及細(xì)胞培養(yǎng)、外泌體純化、核酸提取、修飾鑒定、定量分析等多個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié),每個(gè)環(huán)節(jié)的實(shí)驗(yàn)質(zhì)量都直接影響研究結(jié)果。針對這些核心需求,愛必信推出了覆蓋全流程的產(chǎn)品系列,為你的研究保駕護(hù)航:
1. 細(xì)胞培養(yǎng):提供無外泌體胎牛血清(abs993)、外泌體專用無血清培養(yǎng)基(abs9430)、外泌體專用無血清培養(yǎng)基(含生長因子)(abs9774),有效降低背景污染,保障外泌體的高質(zhì)量分泌。
2. 外泌體純化:涵蓋尺寸排阻色譜(SEC)柱(外泌體純化試劑盒(SEC),abs9777)、沉淀+濾膜(細(xì)胞上清外泌體提取試劑盒,abs50040)等多種純化產(chǎn)品,可根據(jù)樣本量和實(shí)驗(yàn)需求選擇,實(shí)現(xiàn)外泌體的高效、溫和分離,保留其生物活性。
3. 外泌體鑒定與定量:需從形態(tài)學(xué)、粒徑、標(biāo)志物蛋白( Rabbit anti-CD9 Polyclonal Antibody ,abs145771等)檢測,實(shí)現(xiàn)外泌體的形態(tài)、大小及標(biāo)志物的精準(zhǔn)鑒定;另外,愛必信還提供ELISA夾心法檢測外泌體含量的試劑盒(abs50054)。
4. 核酸提取:針對外泌體miRNA/RNA/DNA的提取需求,提供專用提取試劑盒(外泌體RNA提取試劑盒,abs60263等),能高效富集miRNA/RNA/DNA,去除雜質(zhì)干擾,滿足后續(xù)檢測需求;同時(shí)還提供各類miRNA定量檢測試劑盒。
5. 外泌體功能研究:對分離的外泌體進(jìn)行體外標(biāo)記或體內(nèi)活體示蹤,有助于對外泌體的功能進(jìn)行進(jìn)一步的研究。熒光標(biāo)記由于操作簡單方便,是科研人員最chang用的外泌體標(biāo)記方法。愛必信可提供外泌體標(biāo)記熒光染料包括DiR(abs45153692)、DiI(abs42002237)、DiO(abs45153674)、DiD(abs47048165)等。
6. 外泌體工程化修飾:對外泌體進(jìn)行特定的修飾和改造,賦予其細(xì)胞和組織靶向特異性。外泌體表面修飾試劑盒(SA酶),貨號:abs50066,在SA酶的作用下,肽/目的蛋白將被共價(jià)修飾在外泌體表面。
愛必信外泌體研究全流程產(chǎn)品(百余篇文獻(xiàn)驗(yàn)證)
分類 | 貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
細(xì)胞培養(yǎng) | abs993 | 無外泌體胎牛血清 | 50mL |
abs9430 | 外泌體專用無血清培養(yǎng)基 | 500mL | |
abs9774 | 外泌體專用無血清培養(yǎng)基(含生長因子) | 500mL | |
外泌體成品 | abs90118 | HEK293細(xì)胞外泌體標(biāo)準(zhǔn)品 | 1mL |
abs90119 | MSC細(xì)胞外泌體標(biāo)準(zhǔn)品 | 1mL | |
abs90120 | 人胚腎細(xì)胞(293T)外泌體 | 1mL | |
abs90121 | 臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體 | 1mL | |
abs90122 | 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體 | 1mL | |
abs90123 | 人宮頸癌Hela細(xì)胞外泌體 | 1mL | |
外泌體純化 | abs50039 | 血漿血清外泌體提取試劑盒 | 20T |
abs50040 | 細(xì)胞上清外泌體提取試劑盒 | 20T | |
abs9775 | 外泌體提取試劑盒 | 1mL | |
abs9777 | 外泌體純化試劑盒(SEC) | 1mL | |
外泌體樣本前處理 | abs9776 | 外泌體保存液(2×) | 50mL |
abs9587 | 外泌體專用裂解液 | 20mL | |
外泌體鑒定與定量 | abs145771 | Rabbit anti-CD9 Polyclonal Antibody | 100μL |
abs159125 | Rabbit anti-CD63 Monoclonal Antibody(4G3) | 100μL | |
abs159270 | Rabbit anti-CD81 Monoclonal Antibody(3D6) | 100μL | |
abs50054 | 外泌體定量檢測試劑盒 | 96T | |
外泌體修飾與標(biāo)記 | abs50066 | 外泌體表面修飾試劑盒(SA酶) | 20μg |
abs42002237 | DiI 高氯酸鹽 | 100mg | |
abs45153674 | DiO 高氯酸鹽 | 25mg/100mg | |
abs45153692 | DiR 碘化物 | 5mg/25mg/100mg | |
abs47048165 | DiD 對氯苯磺酸鹽 | 10mg/50mg | |
外泌體核酸提取 | abs60364 | 外泌體DNA提取試劑盒 | 50T/100T |
abs60263 | 外泌體RNA提取試劑盒 | 50T/100T | |
abs60565 | 外泌體miRNA提取試劑盒 | 50T/100T | |
miRNA定量檢測
| abs60265 | miRNA加尾法逆轉(zhuǎn)錄試劑盒 | 20T/40T |
abs60266 | 血漿miRNA加尾法逆轉(zhuǎn)錄試劑盒 | 25T/50T | |
abs60271 | miRNA加尾染料法熒光定量PCR試劑盒 | 200T/300T/400T | |
abs60269 | miRNA莖環(huán)法逆轉(zhuǎn)錄試劑盒 | 25T/50T | |
abs60270 | miRNA莖環(huán)染料法熒光定量PCR試劑盒 | 200T/400T | |
abs60267 | miRNA探針法逆轉(zhuǎn)錄試劑盒 | 20T/40T | |
abs60268 | 血漿miRNA探針法逆轉(zhuǎn)錄試劑盒 | 20T/40T | |
abs60272 | miRNA探針法熒光定量PCR試劑 | 100T/200T/400T |
文獻(xiàn)背書
abs993: J Control Release. 2024 Aug:372:531-550. doi: 10.1016/j.jconrel. IF: 10.5
abs45153692: Mol Cancer. 2024 Dec 6;23(1):270. doi: 10.1186/s12943-024-02184-8. IF: 33.9
abs60263: J Agric Food Chem. 2023 Oct 11;71(40):14742-14757. doi:10.1021/acs.jafc.3c03350. IF: 6.1
abs47048165: J Control Release.2025 Jun 10:382:113737. doi:10.1016/j.jconrel.2025.113737. IF: 10.5
abs50054: Materials & Design. May 2024. DOI: 10.1016/j.matdes.2024.112969. IF:7.6
參考文獻(xiàn):
1. Clinical applications of extracellular vesicles: recent advances and emerging trends. Bioeng. Biotechnol.
2. J Extracell Vesicles. 2024 Feb;13(2):e12404. doi: 10.1002/jev2.12404.

Absin產(chǎn)品線:
爆款產(chǎn)品:十da試劑盒(mIHC、IHC、凋亡、ELISA、ChIP、Co-IP、生化檢測、殘留檢測、多因子檢測);細(xì)胞培養(yǎng)(類器官試劑盒+基質(zhì)膠,胎牛血清+培養(yǎng)添加劑+細(xì)胞因子)、分化試劑盒;分子(mRNA合成服務(wù)+提取試劑盒);化合物大包裝;輔助試劑、耗材/儀器、定制服務(wù)(抗體/多肽/蛋白/標(biāo)記/檢測)...
特色產(chǎn)品:雞胚提取物CEE、B27、N2、霍亂毒素B亞單位CTB、牛腦垂體提取物BPE、百日咳毒素PTX、重組人胰島素Insulin、人源低密度脂蛋白LDL...
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