對于神經(jīng)科學(xué)研究人員而言，B-27添加劑無疑是細胞培養(yǎng)中最得力的助手之一。本文將全面介紹這款被廣泛引用的無血清添加劑，從基礎(chǔ)特性到前沿應(yīng)用，幫助您更好地將其應(yīng)用于您的研究工作中。
B-27添加劑是一種成分明確的無血清添加劑，經(jīng)過專門優(yōu)化，用于支持胚胎、出生后和成年海馬及其他CNS神經(jīng)元的低密度或高密度生長以及短期或長期存活。自問世以來，B-27添加劑已成為被引用最多的神經(jīng)元細胞培養(yǎng)添加劑，在神經(jīng)科學(xué)研究中扮演著不ke或缺的角色。
B-27添加劑的完整成分列表包括：
維生素類：生物素、DL-α-生育酚乙酸酯、DL-α-生育酚、維生素A（醋酸酯）
蛋白質(zhì)組分：無脂肪酸BSA（Fraction V）、*酶、人重組胰島素、人轉(zhuǎn)鐵蛋白、超氧化物歧化酶
其他組分：皮質(zhì)酮、D-半乳糖、乙醇胺HCl、谷胱甘肽（還原型）、L-肉堿HCl、亞油酸、亞麻酸、孕酮、腐胺2HCl、亞硒suan鈉、T3（三碘甲狀腺原氨酸）
B-27添加劑的原始無血清神經(jīng)細胞培養(yǎng)添加劑配方由Gregory Brewer博士和同事研發(fā)得到，后經(jīng)優(yōu)化，提供了便于使用、經(jīng)過批量測試的產(chǎn)品。這種科學(xué)配方的優(yōu)勢在于：
成分明確：避免了血清批次間差異對實驗結(jié)果的干擾
專用優(yōu)化：各組分濃度經(jīng)過精心優(yōu)化，專為神經(jīng)細胞設(shè)計
功能全面：同時支持細胞存活、生長和功能表達
B-27添加劑最初是為支持海馬神經(jīng)元和其他CNS神經(jīng)元的生長和長期存活而開發(fā)的。在這一領(lǐng)域的具體應(yīng)用包括：
原代神經(jīng)元培養(yǎng)：支持大鼠海馬和皮質(zhì)神經(jīng)元的長期培養(yǎng)，無需星形膠質(zhì)細胞滋養(yǎng)層
低密度神經(jīng)元培養(yǎng)：即使在高稀釋度下仍能支持神經(jīng)元存活和生長
長期培養(yǎng)：維持神經(jīng)元數(shù)周的健康狀態(tài)，支持神經(jīng)突網(wǎng)絡(luò)發(fā)育和突觸蛋白表達
研究表明，在B-27 Plus添加劑中培養(yǎng)三周的原代大鼠皮層神經(jīng)元表現(xiàn)出高活性的神經(jīng)突網(wǎng)絡(luò)和突觸蛋白的高表達，顯示出優(yōu)異的成熟度和功能性。
B-27添加劑在干細胞研究中發(fā)揮著重要作用，特別是：
神經(jīng)干細胞擴增：使用去除維生素A的B-27添加劑可促進神經(jīng)祖細胞和神經(jīng)干細胞的增殖，而不誘導(dǎo)分化
胚胎干細胞定向分化：支持胚胎干細胞向神經(jīng)元譜系（神經(jīng)元和星形膠質(zhì)細胞）的分化
干細胞來源神經(jīng)元的分化和維持：使用標準B-27添加劑或B-27 Plus添加劑支持干細胞來源神經(jīng)元的成熟和功能維持
近年來，B-27添加劑在快速發(fā)展的類器官研究中展現(xiàn)了巨大價值。復(fù)雜的3D模型相比傳統(tǒng)的2D培養(yǎng)能更準確地重現(xiàn)體內(nèi)神經(jīng)結(jié)構(gòu)和生理學(xué)功能。具體應(yīng)用包括：
中腦類器官：從神經(jīng)上皮干細胞誘導(dǎo)分化人類中腦特異性類器官（hMOs），用于研究神經(jīng)退行性疾病
肝臟類器官：使用不含維生素A的B-27添加劑支持肝細胞來源的類器官長期培養(yǎng)
肺臟類器官：在無血清分化培養(yǎng)基（含B-27）中從人類干細胞培養(yǎng)肺芽類器官（LBOs）
乳腺類器官：建立來自正常和癌變?nèi)祟惾橄俳M織的類器官培養(yǎng)，保留復(fù)雜的上皮譜系
這些3D培養(yǎng)系統(tǒng)在研究胚胎發(fā)育、疾病機制、藥物篩選和再生醫(yī)學(xué)方面顯示出巨大潛力。
B-27添加劑在人類疾病模型構(gòu)建中尤為重要：
阿爾茨海默癥模型：使用B-27系列產(chǎn)品基于人類iPSC開發(fā)自動化、一致性好和時間持久的干細胞培養(yǎng)平臺，模擬AD特征性變化
帕金森病模型：利用中腦類器官構(gòu)建G2019S-LRRK2散發(fā)性帕金森病模型
癌癥模型：建立乳腺癌、肝癌等多種癌癥類器官模型，用于腫瘤生物學(xué)研究和藥物測試
完quan培養(yǎng)基配方：
B-27 Supplement (50X, Serum-free)：2 mL
200mM L-Gln/L-Ala-Gln：0.25 mL
Neurobasal Medium：97.75 mL
總體積：100 mL
注意事項：
用于原代海馬神經(jīng)元細胞初次接種時，需在完quan培養(yǎng)基中額外添加終濃度為25μM的L-谷氨酸
培養(yǎng)至第4天，需使用不添加L-谷氨酸的完quan培養(yǎng)基用于后續(xù)培養(yǎng)
配制好的完quan培養(yǎng)基可放置于2-8°C避光保存，建議2-4周內(nèi)使用
培養(yǎng)表面包被：使用多聚賴氨酸溶液對培養(yǎng)表面在室溫下包被1-2小時或過夜
表面沖洗：用無菌超純水反復(fù)沖洗兩次，che底去除殘留的多聚賴氨酸
表面干燥：在超凈工作臺中通風(fēng)吹干培養(yǎng)表面
細胞接種：按照150-200 cells/mm2的密度接種神經(jīng)元細胞
培養(yǎng)基更換：
培養(yǎng)4-24小時后，更換一半體積的新鮮完quan培養(yǎng)基
對于原代海馬神經(jīng)元，第4天需用不含L-谷氨酸的完quan全培養(yǎng)基更換一半培養(yǎng)基
后續(xù)每三天更換一次培養(yǎng)基
B-27添加劑應(yīng)在冰箱（-5至-20°C）中避光儲存，保質(zhì)期通常為12個月。產(chǎn)品已經(jīng)過濾除菌處理，使用時應(yīng)注意無菌操作，避免污染。建議進行適量分裝凍存，避免反復(fù)凍融，以免影響使用效果。
B-27添加劑作為神經(jīng)細胞培養(yǎng)領(lǐng)域的里程碑產(chǎn)品，近30年的應(yīng)用歷史見證了神經(jīng)科學(xué)的飛速發(fā)展。其科研價值主要體現(xiàn)在：
標準化：提供了成分明確、批次間一致性高的培養(yǎng)環(huán)境，增強了實驗結(jié)果的可靠性和可重復(fù)性
專業(yè)化：針對不同神經(jīng)細胞類型和實驗需求的專業(yè)配方，提升了實驗效率和質(zhì)量
創(chuàng)新賦能：支持從傳統(tǒng)2D培養(yǎng)到復(fù)雜3D類器官的技術(shù)革新，拓展了研究邊界
隨著細胞培養(yǎng)技術(shù)的不斷進步，特別是類器官和器官芯片等前沿領(lǐng)域的發(fā)展，B-27添加劑將繼續(xù)在神經(jīng)科學(xué)研究、疾病模型構(gòu)建、藥物篩選和個性化醫(yī)療中發(fā)揮關(guān)鍵作用。
B-27添加劑從最初的海馬神經(jīng)元培養(yǎng)添加劑，已發(fā)展成為支持多種神經(jīng)細胞類型、覆蓋從基礎(chǔ)研究到前沿類器官研究的全fang位培養(yǎng)系統(tǒng)。無論是研究神經(jīng)發(fā)育、神經(jīng)退行性疾病，還是開發(fā)新的神經(jīng)保護策略，正確選擇和使用B-27添加劑都將為您的實驗成功提供有力保障。隨著新一代B-27 Plus添加劑等產(chǎn)品的推出，這一經(jīng)典產(chǎn)品系列將繼續(xù)為神經(jīng)科學(xué)研究人員提供強有力的技術(shù)支持。
| 貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
|---|---|---|
| abs9120 | B-27添加劑 （50×） | 10mL |
| abs9272 | B-27添加劑（50×，不含維生素A） | 10mL |
Absin產(chǎn)品線：
爆款產(chǎn)品：十da試劑盒(mIHC、IHC、凋亡、ELISA、ChIP、Co-IP、生化檢測、殘留檢測、多因子檢測)；細胞培養(yǎng)(類器官試劑盒+基質(zhì)膠，胎牛血清+培養(yǎng)添加劑+細胞因子)、分化試劑盒；分子(mRNA合成服務(wù)+提取試劑盒)；化合物大包裝；輔助試劑、耗材/儀器、定制服務(wù)(抗體/多肽/蛋白/標記/檢測)...
特色產(chǎn)品：雞胚提取物CEE、B27、N2、霍亂毒素B亞單位CTB、牛腦垂體提取物BPE、百日咳毒素PTX、重組人胰島素Insulin、人源低密度脂蛋白LDL...
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