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MiSeq簇生成失敗?檢查模板管路清洗——MS-102-9999參數(shù)與安裝要點(diǎn)
閱讀:84發(fā)布時(shí)間:2026-5-27
產(chǎn)品技術(shù)參數(shù)
產(chǎn)品名稱 MiSeq® Disposable Wash Tubes
貨號(hào) MS-102-9999
品牌 Illumina
生產(chǎn)企業(yè) Illumina, Inc.(美國)
規(guī)格 20支/包(20 pack)
材質(zhì) 一次性塑料試管
用途 MiSeq/MiSeq Dx測(cè)序儀運(yùn)行后模板管路清洗
配套清洗液 0.01% NaOCl溶液(管內(nèi)配制)
NaOCl配制方法 50μL 1:25 NaOCl稀釋液 + 950μL實(shí)驗(yàn)室級(jí)用水
安裝位置 洗滌塔盤位置17(Pos 17)
安裝深度 試管管頸與塔盤齊平
配合耗材 0.5% Tween 20清洗液、洗滌塔盤、500mL洗瓶
清洗時(shí)長 約30分鐘(含模板管路清洗)
適用機(jī)型 MiSeq系統(tǒng)、MiSeq Dx系統(tǒng)
必需工作流程 VeriSeq PGS、其他需模板清洗的流程
儲(chǔ)存條件 常溫干燥,避免污染
供應(yīng)商 紅榮微再生物
常見問題(FAQ)
Q:MS-102-9999在MiSeq測(cè)序儀中的具體用途是什么?
A: MS-102-9999為MiSeq系統(tǒng)專用一次性洗滌管,用于運(yùn)行后清洗(Post-Run Wash)中的模板管路清洗(Template Line Wash)環(huán)節(jié)。在標(biāo)準(zhǔn)運(yùn)行后清洗基礎(chǔ)上,該試管裝載0.01% NaOCl清洗液,插入洗滌塔盤位置17,通過測(cè)序儀液路系統(tǒng)對(duì)模板管路進(jìn)行深度清潔,去除殘留試劑、鹽分結(jié)晶及交叉污染物,確保下一次運(yùn)行的簇生成效率和測(cè)序數(shù)據(jù)質(zhì)量。
Q:模板管路清洗與普通運(yùn)行后清洗有何區(qū)別?為何必須使用MS-102-9999?
A: 普通運(yùn)行后清洗僅使用0.5% Tween 20清洗液沖洗射流管路和吸管,耗時(shí)約20分鐘,可去除一般殘留試劑和鹽分。模板管路清洗則額外使用0.01% NaOCl溶液,通過MS-102-9999試管導(dǎo)入液路,對(duì)模板管路進(jìn)行氧化消毒,清除可能累積的有機(jī)污染物和生物膜,耗時(shí)約30分鐘。Illumina明確:使用VeriSeq PGS工作流程時(shí),必須執(zhí)行包含模板管路清洗的運(yùn)行后清洗;對(duì)于常規(guī)研究用途,也建議在MCS v2.5或更新版本中定期執(zhí)行,以降低簇生成失敗率和信號(hào)衰減風(fēng)險(xiǎn)。
Q:NaOCl清洗液的配制濃度和步驟是什么?濃度偏差有何后果?
A: 標(biāo)準(zhǔn)配制流程為三步:第一步,將36μL 5% NaOCl注入864μL實(shí)驗(yàn)室級(jí)用水中,混勻得1:25稀釋液;第二步,將50μL該1:25稀釋液注入MS-102-9999試管內(nèi)的950μL實(shí)驗(yàn)室級(jí)用水中,最終得0.01% NaOCl溶液;第三步,將試管插入洗滌塔盤位置17。濃度控制極為關(guān)鍵:若NaOCl濃度過高,可能導(dǎo)致后續(xù)運(yùn)行中簇生成失??;若使用非指定濃度(如直接使用5%原液),可能腐蝕液路系統(tǒng)。若無5% NaOCl,可用實(shí)驗(yàn)室級(jí)用水配制1mL 0.01% NaOCl溶液替代,但嚴(yán)禁在維護(hù)清洗或備用清洗中使用NaOCl。
Q:MS-102-9999在洗滌塔盤中的安裝位置有何要求?裝錯(cuò)會(huì)怎樣?
A: 裝有0.01% NaOCl清洗液的MS-102-9999試管必須插入洗滌塔盤的位置17(Pos 17),并確保試管管頸與塔盤齊平。該位置經(jīng)過液路系統(tǒng)設(shè)計(jì)校準(zhǔn),可使NaOCl溶液在正確時(shí)機(jī)導(dǎo)入模板管路。Illumina警告:若將含NaOCl的試管插入其他位置,不僅無法達(dá)到清洗效果,還可能導(dǎo)致后續(xù)測(cè)序運(yùn)行中簇生成失敗,甚至損壞MiSeq液路系統(tǒng)。操作前務(wù)必核對(duì)塔盤位置編號(hào)。
Q:該產(chǎn)品適用于哪些MiSeq工作流程?VeriSeq PGS是否必須使用?
A: MS-102-9999適用于所有需要模板管路清洗的MiSeq及MiSeq Dx工作流程。其中,VeriSeq PGS(胚胎植入前遺傳學(xué)篩查)工作流程在Illumina系統(tǒng)指南中被明確要求執(zhí)行包含模板管路清洗的運(yùn)行后清洗,因此MS-102-9999是該臨床級(jí)應(yīng)用的必需耗材。對(duì)于常規(guī)NGS研究應(yīng)用(如16S rRNA測(cè)序、靶向重測(cè)序、小型基因組測(cè)序等),雖非每次強(qiáng)制,但建議定期(如每5-10次運(yùn)行或出現(xiàn)簇生成效率下降時(shí))執(zhí)行一次模板管路清洗,以維持儀器最佳性能。
Q:20支/包的規(guī)格如何計(jì)算使用量?儲(chǔ)存條件是什么?
A: MS-102-9999為20支/包標(biāo)準(zhǔn)包裝。每次模板管路清洗消耗1支試管,因此單包可支持20次模板清洗。若實(shí)驗(yàn)室每周執(zhí)行1次模板清洗,單包可用約5個(gè)月;若按VeriSeq PGS高頻運(yùn)行(每次運(yùn)行后均需清洗),需根據(jù)月度運(yùn)行通量計(jì)算采購量。該產(chǎn)品為一次性塑料耗材,無特殊溫控要求,常溫干燥儲(chǔ)存即可,但需避免灰塵污染管口。開封后建議盡快使用,長期暴露可能增加污染風(fēng)險(xiǎn)。
Q:紅榮微再生物的Illumina MiSeq耗材產(chǎn)品線還包括哪些?
A: 紅榮微再生物作為Illumina代理,提供MiSeq系統(tǒng)全系列配套耗材:測(cè)序試劑盒(MS-102-2001/2002/2003 v2系列、MS-102-3001/3003 v3系列)、Nano/Micro試劑盒(MS-103-1001/1002/1003)、PR2緩沖液、HT1緩沖液、PhiX對(duì)照品、流動(dòng)槽(Flow Cell)、洗滌塔盤、清洗瓶,以及文庫制備試劑盒(如TruSeq系列)。
Q:使用MS-102-9999進(jìn)行模板清洗的操作注意事項(xiàng)有哪些?
A: 一是濃度精準(zhǔn),務(wù)必使用5% NaOCl原液按1:25稀釋后再配制0.01%工作液,禁止直接使用高濃度原液;二是位置準(zhǔn)確,僅插入洗滌塔盤位置17,操作前核對(duì)編號(hào);三是時(shí)機(jī)正確,僅在運(yùn)行后清洗(Post-Run Wash)中使用,維護(hù)清洗(Maintenance Wash)和備用清洗(Standby Wash)中禁用NaOCl;四是安全防護(hù),NaOCl為潛在危險(xiǎn)化學(xué)品,操作時(shí)穿戴護(hù)目鏡、手套和實(shí)驗(yàn)服,廢液按化學(xué)廢棄物處理;五是運(yùn)行后保留,清洗完成后將流動(dòng)槽、洗滌塔盤和剩余清洗液留在儀器上,防止吸管干燥進(jìn)氣。
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