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檢測(cè)試劑盒

供貨周期	一個(gè)月	應(yīng)用領(lǐng)域	化工,生物產(chǎn)業(yè)

人蛋白激酶PKB試劑盒用于定量檢測(cè)AKT蛋白濃度及其磷酸化水平。AKT是PI3K信號(hào)通路核心分子，調(diào)控細(xì)胞增殖、凋亡和代謝，與腫瘤發(fā)生密切相關(guān)。采用ELISA法，適用于細(xì)胞裂解液或組織勻漿樣本，僅供科研使用。

詳細(xì)介紹

人蛋白激酶PKB試劑盒

人蛋白激酶PKB試劑盒（Human Protein Kinase B Kit，PKB Kit），又稱人蛋白激酶Akt試劑盒，是基于酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）原理研發(fā)的體外診斷/科研檢測(cè)試劑盒，可特異性檢測(cè)人血清、血漿、組織勻漿及細(xì)胞培養(yǎng)上清中人蛋白激酶PKB（Protein Kinase B，PKB/Akt）的含量，經(jīng)特異性驗(yàn)證、靈敏度測(cè)試及重復(fù)性實(shí)驗(yàn)確認(rèn)，無交叉反應(yīng)，檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠，無試劑降解、雜菌污染等問題。蛋白激酶PKB（Akt）是一種絲an酸/蘇an酸激酶，核心參與PI3K/Akt信號(hào)通路調(diào)控，介導(dǎo)細(xì)胞增殖、分化、凋亡、代謝及遷移等關(guān)鍵生理過程，其異常激活與腫瘤發(fā)生發(fā)展、糖尿病、心血管疾病及神經(jīng)退行性疾病密切相關(guān)，是信號(hào)通路研究、相關(guān)疾病輔助診斷、病情監(jiān)測(cè)及藥物篩選的重要指標(biāo)。本試劑盒核心特征是特異性強(qiáng)、操作便捷、檢測(cè)快速，可精準(zhǔn)定量樣本中PKB含量，廣泛應(yīng)用于臨床檢驗(yàn)、分子生物學(xué)科研、抗腫瘤/降糖藥物篩選、信號(hào)通路機(jī)制研究等領(lǐng)域，是臨床、科研領(lǐng)域的核心激酶相關(guān)檢測(cè)工具。

檢測(cè)原理

本試劑盒的核心檢測(cè)原理，基于酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），聚焦人蛋白激酶PKB（Akt）的抗原抗體特異性結(jié)合特性，結(jié)合激酶類指標(biāo)檢測(cè)的精準(zhǔn)需求設(shè)計(jì)：試劑盒預(yù)先將PKB特異性抗體包被于酶標(biāo)板上，加入待檢測(cè)樣本（血清、血漿等）后，樣本中的PKB會(huì)與酶標(biāo)板上的抗體特異性結(jié)合，形成抗原-抗體復(fù)合物；洗滌去除未結(jié)合的雜蛋白、細(xì)胞碎片、其他激酶及無關(guān)蛋白后，加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的PKB二抗，與復(fù)合物特異性結(jié)合，形成“包被抗體-PKB-酶標(biāo)二抗"的三明治結(jié)構(gòu)；再加入底物液（TMB），HRP催化底物發(fā)生顯色反應(yīng)，顯色強(qiáng)度與樣本中PKB的含量呈正相關(guān)，通過酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線即可計(jì)算出樣本中PKB的具體含量。檢測(cè)流程規(guī)范：樣本采集后需及時(shí)處理（血清/血漿離心分離、細(xì)胞上清收集、組織勻漿破碎離心），按照試劑盒說明書稀釋樣本；酶標(biāo)板平衡至室溫后，依次加入標(biāo)準(zhǔn)品、樣本及空白對(duì)照，37℃孵育30分鐘；洗滌3-5次后加入酶標(biāo)二抗，37℃孵育20分鐘；再次洗滌后加入底物液，37℃避光孵育15分鐘；加入終止液終止反應(yīng)，10分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀測(cè)定OD值，計(jì)算檢測(cè)結(jié)果。

產(chǎn)品特點(diǎn)

本產(chǎn)品針對(duì)人蛋白激酶PKB（Akt）檢測(cè)需求優(yōu)化制備，核心特點(diǎn)如下：1. 特異性強(qiáng)：采用高特異性PKB單克隆抗體，可特異性結(jié)合樣本中的PKB（Akt），不與其他絲an酸/蘇an酸激酶、雜蛋白發(fā)生交叉反應(yīng)，檢測(cè)特異性＞99%，確保檢測(cè)結(jié)果精準(zhǔn)，有效規(guī)避激酶檢測(cè)中的干擾因素；2. 質(zhì)控嚴(yán)格：每批次試劑盒均通過靈敏度、重復(fù)性、特異性及穩(wěn)定性檢測(cè)，附完整QC報(bào)告，確保批內(nèi)變異系數(shù)（CV）＜8%、批間變異系數(shù)（CV）＜10%，檢測(cè)靈敏度可達(dá)0.1ng/mL，符合臨床檢測(cè)與科研標(biāo)準(zhǔn)；3. 操作便捷：試劑盒含全套檢測(cè)試劑（包被酶標(biāo)板、PKB標(biāo)準(zhǔn)品、酶標(biāo)二抗、底物液、終止液、洗滌液等），無需額外配制核心試劑，步驟簡(jiǎn)單，全程可在2.5小時(shí)內(nèi)完成，適配常規(guī)實(shí)驗(yàn)室操作，新手易上手；4. 樣本兼容廣：可適配人血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿四種核心樣本類型，樣本用量少（僅需50μL/孔），無需復(fù)雜預(yù)處理，僅需簡(jiǎn)單離心、稀釋即可檢測(cè)，適配腫瘤、糖尿病等相關(guān)科研與臨床多場(chǎng)景樣本；5. 適配場(chǎng)景廣：可用于腫瘤發(fā)生發(fā)展的輔助診斷與療效監(jiān)測(cè)，糖尿病、心血管疾病的病情評(píng)估，PI3K/Akt信號(hào)通路機(jī)制研究，抗腫瘤、降糖、抗炎藥物篩選，以及臨床檢驗(yàn)、分子生物學(xué)、腫瘤學(xué)實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)檢測(cè)。

適用樣本類型

本試劑盒適配人源樣本的體外檢測(cè)與科研實(shí)驗(yàn)，適用樣本類型明確：人血清樣本（靜脈采血后離心分離，避免溶血，溶血會(huì)干擾檢測(cè)結(jié)果）、人血漿樣本（EDTA或肝素抗凝，離心分離）、人細(xì)胞培養(yǎng)上清樣本（腫瘤細(xì)胞、肝細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞對(duì)數(shù)期上清，離心去除雜質(zhì)）、人組織勻漿樣本（腫瘤組織、肝組織、心肌組織等破碎后離心取上清）；實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景涵蓋肺癌、肝癌、乳腺癌等腫瘤的輔助診斷與療效監(jiān)測(cè)，糖尿病、高血壓等代謝及心血管疾病的病情評(píng)估，PI3K/Akt信號(hào)通路調(diào)控機(jī)制研究，抗腫瘤、降糖藥物篩選與效果評(píng)估，以及相關(guān)實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)檢測(cè)。推薦檢測(cè)體系：使用試劑盒配套酶標(biāo)板，酶標(biāo)儀（波長(zhǎng)450nm），按照說明書步驟操作；樣本稀釋比例為1:10（組織勻漿可根據(jù)濃度適當(dāng)調(diào)整），標(biāo)準(zhǔn)品濃度梯度為0、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6ng/mL，參考區(qū)間為0.3~1.4ng/mL（具體以說明書為準(zhǔn)）。（具體樣本處理方法請(qǐng)參考產(chǎn)品說明書）

儲(chǔ)存與注意事項(xiàng)

1. 試劑盒需全程2-8℃避光冷藏儲(chǔ)存，嚴(yán)禁-20℃冷凍或常溫放置，避免溫度波動(dòng)導(dǎo)致試劑降解、抗體活性喪失；2. 標(biāo)準(zhǔn)品、酶標(biāo)二抗等試劑開封后，密封冷藏保存，1個(gè)月內(nèi)用完，PKB標(biāo)準(zhǔn)品避免反復(fù)凍融，防止其激酶結(jié)構(gòu)破壞，底物液需避光保存；3. 樣本采集后及時(shí)處理，血清/血漿冷藏24小時(shí)內(nèi)完成檢測(cè)，細(xì)胞上清、組織勻漿冷藏或-20℃短期保存，48小時(shí)內(nèi)完成檢測(cè)，避免樣本變質(zhì)、PKB降解；4. 操作時(shí)嚴(yán)格遵循無菌規(guī)范，佩戴防護(hù)用品，避免試劑、樣本接觸皮膚黏膜；檢測(cè)過程中控制孵育溫度與時(shí)間，洗滌充分，避免未結(jié)合試劑殘留導(dǎo)致結(jié)果偏差；5. 底物液具有潛在刺激性，終止液為酸性溶液，操作時(shí)需謹(jǐn)慎，避免接觸衣物與皮膚，檢測(cè)完成后按生物安全規(guī)范處理廢棄試劑與酶標(biāo)板。

訂購(gòu)信息

如需獲取產(chǎn)品詳細(xì)資料、批次質(zhì)檢報(bào)告或報(bào)價(jià)方案，歡迎聯(lián)系上海拜力生物科技有限公司獲取技術(shù)支持與商務(wù)服務(wù)。

以上信息僅供參考，具體請(qǐng)已產(chǎn)品說明書為準(zhǔn)。

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人蛋白激酶PKB試劑盒

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