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品牌概覽
Biosearch Technologies 是美國(guó)專注于核酸化學(xué)(Nucleic Acid Chemistry, NAC)試劑、寡核苷酸合成工具、熒光探針及分子診斷相關(guān)試劑體系的專業(yè)生命科學(xué)品牌,現(xiàn)為 LGC 集團(tuán) Diagnostics & Genomics 業(yè)務(wù)板塊下基因組學(xué)產(chǎn)品線的統(tǒng)一載體。數(shù)十年來,該品牌圍繞「寡核苷酸」這一分子生物學(xué)核心材料,持續(xù)打磨從化學(xué)原料、固相合成耗材、熒光標(biāo)記體系到下游檢測(cè)試劑的全鏈路產(chǎn)品,服務(wù)于學(xué)術(shù)研究、分子診斷開發(fā)、農(nóng)業(yè)基因組學(xué)、制藥與生物技術(shù)等多個(gè)應(yīng)用場(chǎng)景。
與許多只提供單一環(huán)節(jié)的供應(yīng)商不同,Biosearch Technologies 的布局覆蓋了端到端的核酸合成與基因組分析工作流——這意味著它既為需要自行合成寡核苷酸的用戶提供合成儀、CPG 固相載體、磷酰胺單體等底層化學(xué)試劑,也為需要即用型檢測(cè)方案的用戶提供熒光探針染料體系、qPCR 試劑、RNA FISH 探針及核酸純化系統(tǒng)。其產(chǎn)品線并非以「單品爆款」的思路堆砌,而是圍繞寡核苷酸的化學(xué)合成—修飾—標(biāo)記—檢測(cè)這條主線逐步擴(kuò)展,形成了較長(zhǎng)的技術(shù)縱深。
▎核心優(yōu)勢(shì)
① 自研熒光淬滅與報(bào)告體系成熟,化學(xué)底層可控
Biosearch Technologies 是原創(chuàng)開發(fā) Black Hole Quencher®(BHQ™)染料的團(tuán)隊(duì)所屬品牌,并配套發(fā)展了 CAL Fluor®、Quasar®、Pulsar® 等報(bào)告熒光染料系列。BHQ 染料屬于「暗淬滅劑」(dark quencher),本身不產(chǎn)生顯著自發(fā)熒光,依靠寬譜吸收特性匹配多種報(bào)告基團(tuán),從而在 FRET(熒光共振能量轉(zhuǎn)移)型探針結(jié)構(gòu)中實(shí)現(xiàn)信噪比可控的淬滅效果。由于淬滅劑和報(bào)告染料均為內(nèi)部開發(fā),探針設(shè)計(jì)時(shí)可以更系統(tǒng)地統(tǒng)籌吸收譜覆蓋、波長(zhǎng)分區(qū)與多重檢測(cè)通道規(guī)劃,減少不同熒光通道間的串?dāng)_風(fēng)險(xiǎn)。
② 核酸合成化學(xué)品類全,支持從實(shí)驗(yàn)室規(guī)模到規(guī)?;a(chǎn)
其 NAC(Nucleic Acid Chemistry)產(chǎn)品組合整合了多條業(yè)界熟知的供應(yīng)鏈資源——包括 LINK 的固相載體與特種修飾試劑、Berry & Associates 的修飾磷酰胺與核苷類前體、Prime Synthesis 的 CPG 載體方案、BioAutomation 的 MerMade™ 合成儀等——統(tǒng)一歸入 Biosearch Technologies 名下管理。用戶可以在同一供應(yīng)體系內(nèi)獲取 CPG 固相載體、常規(guī)/修飾磷酰胺單體、連接子(linker)、保護(hù)基策略所需試劑及合成儀維護(hù)支持,降低跨供應(yīng)商采購時(shí)出現(xiàn)的批次差異與兼容性問題。
③ 面向分子診斷與檢測(cè)開發(fā)的質(zhì)量體系支撐
生產(chǎn)環(huán)節(jié)參照 cGMP 相關(guān)規(guī)范運(yùn)行,質(zhì)量管理體系覆蓋 ISO 標(biāo)準(zhǔn)相關(guān)要求,產(chǎn)品文件與可追溯性更適合需要向診斷產(chǎn)品轉(zhuǎn)化或開展合規(guī)評(píng)估的客戶項(xiàng)目。對(duì)于從事 IVD assay 開發(fā)、參考品制備、商業(yè)化檢測(cè)試劑盒外包合成的用戶而言,這種質(zhì)量架構(gòu)意味著原料級(jí)別的可審計(jì)性。
④ 工作流視角的產(chǎn)品組織方式,而非零散單品
瀏覽其產(chǎn)品邏輯可以發(fā)現(xiàn)一條清晰的線:核酸提取/純化 → 靶標(biāo)擴(kuò)增(PCR/等溫?cái)U(kuò)增)→ 熒光檢測(cè)(探針/染料/淬滅劑)→ 下游讀?。╭PCR 儀、耗材、分析支持)。這種組織方式讓用戶在搭建或優(yōu)化檢測(cè)流程時(shí),更容易找到彼此匹配的組件,而不是在互不關(guān)聯(lián)的貨號(hào)中自行試錯(cuò)。
▎熱門產(chǎn)品介紹
一、BHQ™(Black Hole Quencher®)雙標(biāo)記熒光探針 / Dual-Labeled BHQ® Probes
? 品名
BHQ™ 雙標(biāo)記熒光探針(Dual-Labeled BHQ® Probes),亦常稱作 FRET 探針——在寡核苷酸的 5′ 端標(biāo)記熒光報(bào)告基團(tuán)(如 FAM、HEX、CAL Fluor® 系列等)、3′ 端標(biāo)記 BHQ™ 淬滅劑。
? 產(chǎn)品特點(diǎn)
• BHQ 為暗猝滅劑,無顯著自身熒光,吸收譜較寬,可適配多種報(bào)告染料的光譜區(qū)間;
• 探針僅在靶序列特異性延伸/雜交后釋放熒光信號(hào),因此相比嵌入型染料(如 SYBR Green)更能區(qū)分特異性產(chǎn)物與非特異性擴(kuò)增(如引物二聚體);
• 支持多種報(bào)告基團(tuán)、淬滅劑與化學(xué)修飾的組合,便于多重 qPCR 通道分配;
• 可提供定制合成服務(wù),按用戶的靶序列、長(zhǎng)度、修飾與標(biāo)記需求合成并交付。
? 存儲(chǔ)條件(通用指引;具體以每批 COA 為準(zhǔn))
• 干燥寡核苷酸粉末:建議在 –20 °C 避光保存,保持干燥;
• 溶解后的探針工作液:通常 –20 °C 避光分裝保存,避免反復(fù)凍融;水溶液 pH 與 TE 緩沖體系依合成末端化學(xué)而定;
• 所有含熒光基團(tuán)的寡核苷酸制品均應(yīng)避光操作(鋁箔包裹或使用棕色管)。
? 工作原理
建立在 FRET(F?rster Resonance Energy Transfer,熒光共振能量轉(zhuǎn)移)原理之上:探針完整時(shí),5′ 的報(bào)告熒光基團(tuán)與 3′ 的 BHQ 淬滅劑空間距離近,報(bào)告基團(tuán)的激發(fā)能通過非輻射能量轉(zhuǎn)移被 BHQ 吸收,熒光處于「關(guān)閉」?fàn)顟B(tài);當(dāng) PCR 擴(kuò)增過程中探針因引物延伸或 Taq 酶的 5′→3′ 外切酶活性被切割/降解后,報(bào)告基團(tuán)與淬滅劑分離,熒光恢復(fù),信號(hào)隨靶標(biāo)積累而增加,從而以實(shí)時(shí)方式反映擴(kuò)增量。
? 使用方法(典型步驟概述)
1. 反應(yīng)體系配制:在 qPCR 反應(yīng)管中加入模板 cDNA/DNA、引物對(duì)、BHQ 探針(終濃度常見在 50–250 nM 范圍,具體依 assay 優(yōu)化)、熱啟動(dòng) Taq 聚合酶 mix、dNTP、Mg2?緩沖體系及無核酸酶水。
2. 程序運(yùn)行:95 °C 初始變性 → 循環(huán)(95 °C 變性 / 退火溫度 50–60 °C → 72 °C 延伸)→ 按儀器要求設(shè)置熒光采集點(diǎn)(通常在退火/延伸段或每循環(huán)末采集)。
3. 數(shù)據(jù)分析:以 Ct 值進(jìn)行相對(duì)或絕對(duì)定量;由于探針依賴序列特異性雜交,熔解曲線仍可輔助確認(rèn)產(chǎn)物單一性,但主要判別依據(jù)為探針通道的閾值循環(huán)數(shù)。
二、BHQplus® Probes
? 品名
BHQplus® Probes(BHQplus 探針)
? 產(chǎn)品特點(diǎn)
在標(biāo)準(zhǔn)雙標(biāo)記 BHQ 探針基礎(chǔ)上引入了額外的化學(xué)穩(wěn)定化修飾(雙鏈穩(wěn)定化學(xué)強(qiáng)化處理),以提升探針的熔解溫度(Tm)并提高靶序列區(qū)分的嚴(yán)格性;在 GC 豐富、二級(jí)結(jié)構(gòu)明顯或存在序列相似旁系同源區(qū)的靶標(biāo)場(chǎng)景中,有助于降低非特異性熒光釋放。
? 存儲(chǔ)條件
與常規(guī) BHQ 探針一致:干燥品 –20 °C 避光干燥保存;溶解液 –20 °C 避光、分裝、減少凍融。
? 工作原理
同樣基于 FRET 的「近距離淬滅 → 切割/解離后發(fā)光」機(jī)制,但通過骨架與堿基堆積環(huán)境的化學(xué)調(diào)整使探針與目標(biāo) DNA 的結(jié)合更緊密,從而在較高嚴(yán)謹(jǐn)度條件下仍維持雜交穩(wěn)定性——本質(zhì)上是在「防止誤觸發(fā)」與「保證信號(hào)釋放效率」之間做進(jìn)一步優(yōu)化。
? 使用方法
操作流程與普通 TaqMan-style 探針 qPCR 基本一致,但需要注意:
• 退火溫度可適當(dāng)上調(diào)以利用更高的 Tm;
• 若遷移已有 assay,建議重新做探針濃度梯度與退火溫度矩陣(DoE 小網(wǎng)格)來確定新的優(yōu)條件,而不是直接照搬舊參數(shù)。
三、CAL Fluor® / Quasar® / Pulsar® 熒光染料體系(報(bào)告染料)
? 品名
CAL Fluor® 染料、Quasar® 染料、Pulsar® 染料(用于寡核苷酸 5′ 標(biāo)記或內(nèi)部標(biāo)記的報(bào)告熒光基團(tuán))
? 產(chǎn)品特點(diǎn)
• 這套染料譜系覆蓋了可見光譜到近紅外(NIR)區(qū)間的多個(gè)通道,便于構(gòu)建 3–5 重甚至更多重的 qPCR 檢測(cè)組合;
• 與 BHQ-1/BHQ-2/BHQ-3 等淬滅劑按光譜重疊關(guān)系配對(duì)使用,可系統(tǒng)化規(guī)劃通道;
• 提供對(duì)應(yīng)的磷酰胺形式(DMT amidite)供寡核苷酸合成時(shí)直接引入,也通過定制合成服務(wù)以成品探針形式交付。
? 存儲(chǔ)條件
• 染料標(biāo)記的寡核苷酸:–20 °C 避光、干燥或合適緩沖液中分裝;
• 磷酰胺單體化學(xué)品:–20 °C 以下惰性氣氛(氮?dú)?氬氣)防潮保存,避免接觸水氣(遇水水解)。
? 工作原理
報(bào)告染料本身是一個(gè)可被特定激發(fā)光驅(qū)動(dòng)、在特定發(fā)射窗口發(fā)出可檢測(cè)熒光的發(fā)色團(tuán);當(dāng)其作為探針的一部分參與 FRET 結(jié)構(gòu)時(shí),只有在淬滅解除后才貢獻(xiàn)可讀信號(hào)。多重檢測(cè)的本質(zhì)就是「把不同報(bào)告染料分配到不同激發(fā)/發(fā)射通道,并用 BHQ 的寬譜吸收統(tǒng)一吃掉未切割狀態(tài)的熒光」。
? 使用方法
這類染料更多是以「探針的構(gòu)成元件」出現(xiàn),終端用戶通常通過訂購成品探針直接使用;若你所在實(shí)驗(yàn)室具備寡核苷酸合成與脫保護(hù)能力,則可通過 Biosearch 提供的對(duì)應(yīng)磷酰胺試劑將其編入合成循環(huán)——此時(shí)需嚴(yán)格遵循亞磷酰胺合成化學(xué)的操作規(guī)范(無水無氧、精確偶pling/氧化/脫 DMT 時(shí)序等),并按最終產(chǎn)物做 HPLC/PAGE 純化與質(zhì)譜驗(yàn)證。
四、Stellaris® RNA FISH 探針(DesignReady 與 Custom 兩類)
? 品名
Stellaris® RNA FISH 探針組(DesignReady 預(yù)設(shè)計(jì)目錄探針 / Custom 自定義探針組)
? 產(chǎn)品特點(diǎn)
• 不是單一的一條探針,而是由多達(dá)約 48 條針對(duì)同一目標(biāo) RNA 轉(zhuǎn)錄本不同區(qū)段、各自攜帶熒光標(biāo)記的寡核苷酸組成的探針池;
• 多條探針同時(shí)結(jié)合同一個(gè) RNA 分子時(shí),熒光信號(hào)疊加形成可被熒光顯微鏡分辨的「點(diǎn)狀信號(hào)」,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)單個(gè) RNA 分子在細(xì)胞/組織中的定位 + 可視化計(jì)數(shù);
• 提供在線探針設(shè)計(jì)工具(Stellaris RNA FISH Probe Designer)協(xié)助自定義靶標(biāo)設(shè)計(jì);
• 配套提供 Stellaris Buffers 緩沖體系以壓制背景、改善信噪表現(xiàn)。
? 存儲(chǔ)條件
• 探針池溶液通常建議 –20 °C 避光保存、分裝;避免反復(fù)凍融導(dǎo)致寡核苷酸降解或聚集體增加;
• 緩沖液組分按說明書指示(一般 4 °C 或 –20 °C,視配方而定)。
? 工作原理
基于熒光原位雜交(FISH)原理:經(jīng)固定透化的細(xì)胞/組織樣本中,目標(biāo) RNA 保留其空間分布;探針池中的每條寡核苷酸與目標(biāo)序列互補(bǔ)配對(duì),當(dāng)足夠比例的探針結(jié)合到同一 RNA 分子上時(shí),多個(gè)熒光標(biāo)簽集中在衍射極限尺度內(nèi)形成可檢出的亮點(diǎn)。通過熒光顯微鏡采集并結(jié)合分析軟件,可獲得:
• RNA 在亞細(xì)胞中的定位信息(胞質(zhì)、核周邊、應(yīng)激顆粒等)
• 近似轉(zhuǎn)錄本豐度的點(diǎn)計(jì)數(shù)(單位面積/單位細(xì)胞中的 spot 數(shù))
? 使用方法(典型流程概述)
1. 樣本固定與透化:常用 3.7% 多聚甲醛(PFA)固定,隨后用 PBS 洗滌;透化可用去垢劑(如 Triton X-100 或皂苷類,依樣本類型調(diào)整)。
2. 雜交:將探針池稀釋于配套雜交緩沖液(含甲酰胺、鹽、封閉組分與 RNase 抑制劑/封閉核酸)中,滴加于樣本,覆蓋蓋片,通常 37–42 °C 孵育過夜(具體溫度與時(shí)長(zhǎng)按推薦方案)。
3. 洗脫:用預(yù)熱洗液(常含一定比例甲酰胺與 SSC)去除非特異性結(jié)合,可加入 DAPI 復(fù)染核。
4. 封片成像:用抗淬滅封片劑封片,于配備對(duì)應(yīng)濾光片組的熒光顯微鏡下采集圖像。
5. 分析:spot 計(jì)數(shù)與空間分布統(tǒng)計(jì)建議使用專用圖像分析流程(如 FISH-quant 類工作流或商業(yè)分析模塊),并注意設(shè)置陰性對(duì)照與 RNase 處理對(duì)照以評(píng)估背景基線。
提示:某些細(xì)胞和組織在綠色通道存在自發(fā)熒光(來自脂褐素、彈性纖維等),因此 FAM 標(biāo)記未必總是優(yōu)選,常建議改用紅移染料(如 Quasar 670/CAL Fluor Red 等)以避免背景抬升——這也是 Biosearch 在探針設(shè)計(jì)說明中反復(fù)提醒的一點(diǎn)。
五、RapiDxFire™ Hot Start Taq DNA Polymerase / 相關(guān) PCR 酶與 Mix 體系
? 品名
RapiDxFire™ Hot Start Taq DNA Polymerase 及相關(guān)預(yù)混體系(2× Master Mix 等形式)
? 產(chǎn)品特點(diǎn)
• 熱啟動(dòng)機(jī)制可在室溫配制階段抑制非特異性起始,減少引物二聚體和非靶擴(kuò)增;
• 酶在增強(qiáng)儲(chǔ)存緩沖液(如無甘油配方選項(xiàng))中保持穩(wěn)定性,適合物流與庫存周期較長(zhǎng)的使用場(chǎng)景;
• 配套體系面向 qPCR 檢測(cè)靈敏度需求設(shè)計(jì),可用于低豐度靶標(biāo)檢測(cè)。
? 存儲(chǔ)條件
通常 –20 °C 保存(避光);含酶混合液避免反復(fù)凍融,建議分裝或按使用頻次規(guī)劃取用次數(shù)。
? 工作原理
Taq DNA 聚合酶來自嗜熱菌 Thermus aquaticus,可在 PCR 循環(huán)中耐受 95 °C 變性步驟;Hot Start 形式通過化學(xué)修飾或抗體掩蔽使聚合酶活性在室溫下保持失活狀態(tài),僅在初始高溫步驟(如 95 °C 保持 2–10 min)后才充分激活——從而減少低溫下引物與模板的非特異退火所導(dǎo)致的錯(cuò)誤延伸。
? 使用方法
1. thaw 各組分于冰上,輕柔混勻;
2. 按體系配方加入 2× RapiDxFire Master Mix、前后引物、探針(如使用)、模板與無核酸酶水至終體積;
3. 程序:95 °C 初始激活/變性 → 循環(huán)(95 °C 變性 15–30 s / 退火 20–60 s / 延伸 20–60 s,依片段長(zhǎng)度與儀器熱傳導(dǎo)微調(diào))→ 可選熔解曲線;
4. 運(yùn)行結(jié)束后檢查擴(kuò)增曲線形態(tài)、Ct 分布與標(biāo)準(zhǔn)曲線(定量 assay 需要)。
六、sbeadex™ 核酸純化試劑盒(磁性微粒系)
? 品名
sbeadex™ 系列核酸純化/提取試劑盒(血液 DNA、病毒 RNA/DNA、植物/組織 DNA 等適用版本)
? 產(chǎn)品特點(diǎn)
• 以磁性微粒(magnetic beads)為載體,通過選擇性吸附—洗滌—洗脫完成核酸分離;
• 可適配手動(dòng)操作或自動(dòng)化液體處理平臺(tái);流程步驟數(shù)較少,利于縮短周轉(zhuǎn)時(shí)間;
• 針對(duì)不同樣本基質(zhì)(全血、拭子、植物組織等)提供對(duì)應(yīng)裂解與結(jié)合條件版本。
? 存儲(chǔ)條件
按說明書:磁珠懸液通常室溫或 4 °C(視具體 kit 規(guī)定),避免冷凍磁珠懸液;裂解液/結(jié)合液等可能含易揮發(fā)或溫度敏感組分,留意瓶簽警示。
? 工作原理
在高鹽/離液鹽與 pH 調(diào)控下,核酸被吸附到磁珠表面官能團(tuán)上;隨后通過磁力沉降分離液相,棄廢液,經(jīng)一至兩輪洗滌去除蛋白與污染物,最后在低離子強(qiáng)度洗脫緩沖液中將純化的核酸回收。
? 使用方法(手動(dòng)法概要)
1. 樣本 + 裂解液混勻、孵育(可能伴隨蛋白酶 K 等步驟,依 kit);
2. 加入磁珠懸液,結(jié)合一段時(shí)間;
3. 將管放磁力架,等待磁珠貼壁后吸棄上清;
4. 加洗滌液 1 / 洗滌液 2 依次洗滌(每次貼壁后棄液);
5. 開蓋短暫風(fēng)干至「不見明顯乙醇?xì)埩舻积斄寻l(fā)白過度」的程度;
6. 加洗脫緩沖液(TE 或無核酸酶水),稍加孵育后磁力沉降,轉(zhuǎn)移含核酸的上清至新管。
七、NAC 合成化學(xué)試劑與 MerMade™ 寡核苷酸合成儀(針對(duì)自建合成平臺(tái)的用戶)
? 品名
• CPG 固相載體柱/袋(Unmodified & Modified Synthesis Columns)
• 標(biāo)準(zhǔn)與修飾磷酰胺單體(A/B/C/G/T/dN 及各類 2′-O-Me、2′-F、LNA 前體、生素 linker、熒光 linker 等)
• MerMade™ 系列寡核苷酸合成儀
? 產(chǎn)品特點(diǎn)
• 提供從 50 nmol 到 mmol 級(jí)不同載量的 CPG 載體,覆蓋研發(fā)小量與中試放大;
• 修飾單體目錄廣泛,滿足 siRNA、反義寡核苷酸(ASO 相關(guān)化學(xué))、適配體等不同項(xiàng)目的特殊核苷需求;
• 合成儀產(chǎn)品線覆蓋不同通量,適合從學(xué)術(shù)核心設(shè)施到 CDMO/診斷公司自有產(chǎn)線。
? 存儲(chǔ)條件
• 磷酰胺單體:–20 °C 惰性氣氛防潮(干燥器/手套箱級(jí)別存放最佳);
• CPG 載體:室溫干燥或 4 °C 干燥,防潮;
• 溶劑/活化劑(如四氮唑類)按瓶簽注明(干燥、避光、密閉)。
? 工作原理(固相亞磷酰胺法概要)
寡核苷酸在 CPG 固相載體的 3′-端逐堿基延伸:
(1) 脫 DMT(酸處理)→ 游離 5′-OH
(2) 偶聯(lián)(下一個(gè)堿基的磷酰胺單體在活化劑作用下與 5′-OH 形成磷酯鍵)
(3) 氧化/硫化(將 III 價(jià)亞磷酯轉(zhuǎn)為更穩(wěn)定 V 價(jià)磷酸酯/硫代磷酸酯)
(4) 封端(乙酰化未反應(yīng)羥基以防繼續(xù)鏈延伸導(dǎo)致 n-1 雜質(zhì))
循環(huán)往復(fù),最后經(jīng)氨onia/胺脫保護(hù)與純化(脫鹽/HPLC/PAGE/RP)得終產(chǎn)物。
? 使用方法
屬專業(yè)設(shè)備與濕化學(xué)操作,需由具備合成經(jīng)驗(yàn)的人員按合成儀 SOP 與對(duì)應(yīng)單體/溶劑兼容性表執(zhí)行,并安排適當(dāng)?shù)膹U液處理與通風(fēng)防護(hù)。
▎這些產(chǎn)品解決實(shí)驗(yàn)中的哪些問題
很多實(shí)驗(yàn)挫折追根溯源并不在「人的操作大意」,而在原料與體系本身的匹配度不足。Biosearch Technologies 圍繞寡核苷酸化學(xué)與熒光檢測(cè)這一主軸提供的方案,針對(duì)性地緩解了幾類長(zhǎng)期存在的實(shí)驗(yàn)痛點(diǎn):
① qPCR 非特異性信號(hào)干擾與引物二聚體噪聲
嵌入型染料體系雖然便宜,但當(dāng)擴(kuò)增復(fù)雜模板或存在大量非特異結(jié)合傾向時(shí),熔解曲線的單一峰并不能保證熒光來源干凈。BHQ 雙標(biāo)記探針通過序列依賴的熒光釋放機(jī)制,把信號(hào)與靶序列綁定在一起,減少假陽性判定風(fēng)險(xiǎn)——尤其在低拷貝靶標(biāo)、臨床樣本少見突變株鑒定、轉(zhuǎn)基因事件定量等對(duì)特異性要求高的場(chǎng)景。
② 多重檢測(cè)通道規(guī)劃困難、染料光譜打架
實(shí)驗(yàn)室在做多重 qPCR 時(shí)常遇到:買了不同公司的染料標(biāo)記探針后發(fā)現(xiàn)通道串?dāng)_嚴(yán)重、淬滅效率不均、某個(gè)通道背景太高。Biosearch 的優(yōu)勢(shì)在于報(bào)告染料與淬滅劑出自同一體系的開發(fā)邏輯,BHQ 的寬譜吸收能與 CAL Fluor / Quasar 系列做通道分區(qū)規(guī)劃,減少「顏色上了但數(shù)據(jù)沒法用」的尷尬。
③ 單分子 RNA 信息被群體平均掩蓋
傳統(tǒng) RT-qPCR 給你「這個(gè)孔里有多少轉(zhuǎn)錄本」,但看不到「哪些細(xì)胞高表達(dá)、哪些幾乎為零、轉(zhuǎn)錄本在核周邊還是突起」。Stellaris RNA FISH 通過多探針捆綁策略把單條 RNA 變成可見的點(diǎn),補(bǔ)了群體平均數(shù)據(jù)與空間異質(zhì)性之間的信息斷層——特別適合干細(xì)胞異質(zhì)性、神經(jīng)元基因表達(dá) mosaicism、藥物處理后亞群響應(yīng)等課題。
④ 核酸合成平臺(tái)的材料來源碎片化導(dǎo)致批次波動(dòng)
對(duì)于需要自己合成和修改寡核苷酸的機(jī)構(gòu)(核心設(shè)施、診斷研發(fā)實(shí)驗(yàn)室、CDMO),從不同供應(yīng)商拼湊 CPG、單體、linker 和儀器配件時(shí),經(jīng)常遇到:到貨批次間耦合效率漂移、某批次單體溶解度異常、儀器配件停產(chǎn)找不到替代型號(hào)。Biosearch 的 NAC 一體化供應(yīng)模式把這些環(huán)節(jié)納入同一產(chǎn)品管理與技術(shù)服務(wù)體系,降低「換一家供應(yīng)商就要重新驗(yàn)證半條線」的成本。
⑤ 核酸提取環(huán)節(jié)成為通量瓶頸或得率不穩(wěn)
磁珠法純化(sbeadex 體系)相比離心柱法更容易走向自動(dòng)化、更容易放大體積,也更少受柱膜堵塞影響——在拭子樣本、血液大批量篩查或植物次生代謝物多的高抑制定劑樣本中,往往能提供更一致的回收。
▎購買 Biosearch Technologies 產(chǎn)品:常見疑問與解答
以下內(nèi)容整理自該品牌技術(shù)溝通中用戶反復(fù)提出的方向,以 Q&A 形式呈現(xiàn),供選型前自查。
Q1:我們是高校課題組,只做常規(guī) qPCR,是否需要 BHQ 探針?SYBR Green 不夠嗎?
A:SYBR Green 可以勝任很多表達(dá)初篩與內(nèi)參歸一化工作;但一旦涉及以下情況,F(xiàn)RET 探針的額外成本通常能換來數(shù)據(jù)可信度的提升:
• 模板復(fù)雜度高(基因組 DNA 背景深、多基因家族成員序列接近)
• 需要區(qū)分 SNP / 突變型與野生型(探針可設(shè)計(jì)為 allele-specific)
• 計(jì)劃發(fā)表對(duì)定量嚴(yán)謹(jǐn)性要求較高的結(jié)果、或后續(xù)要轉(zhuǎn)成檢測(cè)產(chǎn)品開發(fā)
這時(shí) BHQ 雙標(biāo)記探針能提供更強(qiáng)的序列依賴性信號(hào)門控。預(yù)算有限,也可先從關(guān)鍵靶標(biāo)探針化、其余維持 SYBR 的方式分步推進(jìn)。
Q2:BHQ-1、BHQ-2、BHQ-3 怎么選?
A:大致按報(bào)告染料的發(fā)射波長(zhǎng)分區(qū)來搭配——BHQ-1 常用于 FITC/藍(lán)色-綠區(qū)報(bào)告(如 FAM、HEX 附近),BHQ-2 對(duì)應(yīng)黃-橙-紅區(qū),BHQ-3 對(duì)應(yīng)遠(yuǎn)紅/近紅外區(qū)。選型的本質(zhì)是讓淬滅劑吸收譜覆蓋報(bào)告基團(tuán)的發(fā)射峰,同時(shí)讓不同探針對(duì)的通道在濾光片組中盡可能正交。若做 3–4 重以上,建議讓 Biosearch 技術(shù)支持或在線設(shè)計(jì)工具幫你做通道分配復(fù)核。
Q3:Stellaris RNA FISH 聽起來步驟多——是不是只適合「有專門成像平臺(tái)」的實(shí)驗(yàn)室?
A:它需要的是一臺(tái)能采熒光 z-stack 或至少多通道快照的顯微鏡(共聚焦更佳,但寬場(chǎng)也可先做可行性),以及樣本固定透化流程的穩(wěn)定性。真正拉開差距的不是設(shè)備貴不貴,而是樣本制備的一致性:固定延遲、透化過度/不足、雜交溫度偏差都會(huì)直接影響 spot 可見度。建議初次使用者先選用 DesignReady 目錄探針 + 配套緩沖液跑通流程,再考慮全自定義靶標(biāo)。
Q4:我們想自建寡核苷酸合成,但擔(dān)心「買回一堆化學(xué)品不會(huì)調(diào)工藝」——Biosearch 是否提供技術(shù)支持?
A:其 NAC 業(yè)務(wù)線配有專門的應(yīng)用支持團(tuán)隊(duì),覆蓋合成化學(xué)與儀器服務(wù),內(nèi)容包括合成儀裝機(jī)培訓(xùn)、耦合效率優(yōu)化、批次放行指標(biāo)解讀與故障排查。但需明確:自建合成意味著你方也要承接化學(xué)廢物、溶劑管理、壓縮氣體與惰性氣氛系統(tǒng)的合規(guī)性——這些不屬于產(chǎn)品本身,卻是能否長(zhǎng)期穩(wěn)定運(yùn)行的前提。
Q5:產(chǎn)品到貨后萬一發(fā)現(xiàn)信號(hào)弱 / 擴(kuò)增曲線不平 / 背景高,如何判斷是探針問題還是體系問題?
A:可按以下順序做最小拆分驗(yàn)證:
1) 先跑標(biāo)準(zhǔn)品梯梯(10倍或5倍稀釋)看斜率與 R2,排除「模板本身降解/加樣誤差」;
2) 單獨(dú)測(cè)探針-only 的熒光基線(不加模板、不加酶,僅探針 + 緩沖液)確認(rèn)無明顯泄漏熒光;
3) 降退火溫度做矩陣(引物濃度 × 探針濃度)看噪聲是否隨引物升高——若是,多半是引物二聚體主導(dǎo),需要重新設(shè)計(jì)引物或加探針競(jìng)爭(zhēng)嚴(yán)謹(jǐn)度;
4) 若仍異常,將批號(hào)與合成報(bào)告(COA)中的消光系數(shù)/標(biāo)記率信息提供給技術(shù)支持做回溯。
多數(shù)情況下問題出在引物設(shè)計(jì)/退火溫度/模板質(zhì)量三者之一,而非探針本身失效。
Q6:訂購定制探針時(shí),需要提供哪些信息才能讓合成端一次做對(duì)?
A:盡量給出:靶序列(或引物/探針完整序列)、5′/3′ 修飾要求、所需標(biāo)記染料(及通道偏好)、純化等級(jí)(Desalt / HPLC / PAGE,依用途選)、溶解緩沖液偏好、交付濃度與管數(shù)分裝要求。若用于 published assay 的重現(xiàn),附原始文獻(xiàn)的探針序列與修飾寫法截圖能大幅減少來回確認(rèn)時(shí)間。
Q7:儲(chǔ)存與反復(fù)凍融到底有多重要?為什么有時(shí)候放半年信號(hào)就掉很多?
A:寡核苷酸本身在 –20 °C 干燥狀態(tài)下相當(dāng)穩(wěn)定,但兩個(gè)因素最致命:① 水分(冷凝水進(jìn)入小管)加速水解;② 光(尤其熒光基團(tuán)對(duì)光敏感)。反復(fù)凍融會(huì)讓溶液中局部濃縮效應(yīng)與冰晶界面效應(yīng)反復(fù)作用,標(biāo)記探針更容易出現(xiàn)碎片與背景上升。實(shí)用做法:收到分裝成 5–10 管小份,每次只取一份使用,全程避光。
▎特約經(jīng)銷渠道
Biosearch Technologies 相關(guān)產(chǎn)品在中國(guó)市場(chǎng)的詢價(jià)、訂貨與技術(shù)對(duì)接,可通過其特約代理經(jīng)銷商 上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司 辦理。該渠道覆蓋品牌目錄范圍內(nèi)的試劑、合成化學(xué)耗材與相關(guān)配套選型咨詢,便于國(guó)內(nèi)實(shí)驗(yàn)室以較穩(wěn)定的供貨路徑完成采購與售后追溯。
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(注:本文內(nèi)容基于品牌公開資料及行業(yè)常規(guī)信息整理,具體以品牌信息文檔為準(zhǔn)。)
??Biosearch Technologies熱賣產(chǎn)品
貨號(hào) | 品名 | 規(guī)格 |
N-5050XL-10 | NP-BSA (Bovine Serum Albumin) Ratio 1-4 | 10mg |
N-5060-25 | NP-KLH (Keyhole Limpet Hemocyanin) | 25mg |
N-5060-5 | NP-KLH (Keyhole Limpet Hemocyanin) | 5mg |
f-1420-10 | NP-AECM-FICOLL | 10mg |
N-5050H-10 | NP-BSA (Bovine Serum Albumin) Ratio > 20 | 10mg |
N-5055E-5 | NP-CGG (Chicken Gamma Globulin), Ratio > 40 | 5mg |
N-5070-1 | NP-PE (Phycoerythrin) | 1mg |
N-5055c-5 | NP-CGG (Chicken Gamma Globulin), Ratio 20-29 | 5mg |
SMF-HB1-10 | Stellaris® RNA FISH Hybridization Buffer | 10mL |
SMF-WB1-20 | Stellaris® RNA FISH Wash Buffer B | 20mL |
BNS-6001-250 | 5-Nitroindole Amidite | 250mg |
CIS40025 | CopyCutter Induction Solution | 25mL |
D-5059-10 | DNP-HSA (Human Serum Albumin) | 10mg |
FT6220-B005 | 5-Carboxytetramethylrhodamine N-Hydroxysuccinimide Ester | 5mg/瓶 |
N-1027-5 | NIP-BSA-Biotin | 5 mg |
N-5051-10 | NP-OVAL (Ovalbumin) | 10mg |
SMF-WA1-60 | Stellaris® RNA FISH Wash Buffer A | 60mL |
AMP0256.18-01 | 諾氟汀草酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液Norfluoxetine Oxalate | 1mL |
BA0308-F100 | 5-Octadiynyl-dU CE-Phosphoramidite, 100 µmol, ABI (5 mL / 20 mm Septum) | ea |
BG7-0037-BULK | LCAA (CNA) 1000 ? CPG, BULK | 1g |
BHQ-2000S-5 | BHQ-2 Carboxylic Acid, Succinimidyl Ester 5 mg | 5mg |
BHQ-3000S-25 | BHQ-3 Carboxylic Acid, Succinimidyl Ester | 25mg |
BHQ-3001-5 | BHQ-3 Amine 5 mg | 5mg |
EC300110 | TransforMax™ EPI300™ Electrocompetent E. coli | 20 Reactions |
F-1420-100 | NP-AECM-FICOLL, 100 mg | 100mg |
FC-1065S-5 | Quasar 670琥珀酰亞胺酯: Quasar 670 Succinimidyl Ester | 5mg |
FOR0256.18 | 鹽酸氟汀雜質(zhì)Norfluoxetine Oxalate | 10mg |
KBS-1050-201 | KASP-TF V5.0 2X Master Mix | 2.5 mL |
LK2068-F100 | Fluorescein-dT CE-Phosphoramidite, 100 μmol, ABI (8 mL / 20 mm Septum) | 100 umol |
LK2072-B250 | 8-oxo-dG(iBu) CE-Phosphoramidite, BULK (g), HDPE Screw-Top | 250mg |
LK2126-F100 | 5'-Thiol Modifier C6 S-S CE-Phosphoramidite 100umol | ea |
LK2139-F100 | 6-Fluorescein CE-Phosphoramidite, 100 μmol, ABI (8 mL / 20 mm Septum) | 100 umol |
N-1026-5 | NP-BSA-Biotin | 5mg |
N-5051-100 | NP-OVAL (Ovalbumin) | 100mg |
NAP40-025-01 | sbeadex™ pathogen nucleic acid purification kit no DG (96 extr.) | 96 |
NAP44701 | sbeadex livestock kit | 96 |
O-1000-100 | Ovalbumin (Oval), 100 mg | 100mg |
PY7588-B050 | 5-Hydroxymethyl-2'-deoxycytidine, 50 mg, Glass Screw-Top | 50mg |
QE0905T-5ml | QuickExtract™ DNA Extraction Solution | 5ml |
SMF-2038-1 | Stellaris® FISH Probes, Human XIST with Quasar® 570 Dye; 1 nmol delivered | 1nmolTotal |
30221-2 | NxGen phi29 DNA Polymerase | 10,000 U @ 10 U/ul |
30221-3 | NxGen phi29 DNA Polymerase | 50,000 U @ 10 U/uL |
30250-1 | RapiDxFire Thermostable Reverse Transcriptase | 50 x 25 uL reactions |
30250-2 | RapiDxFire Thermostable Reverse Transcriptase | 250 x 25 uL reactions |
7226-77-9 | 5-Hydroxymethyl-2'-deoxycytidine | 100mg |
78GG10064-1g | 5-Nitroindole CE-Phosphoramidite | 1g |
AXIT384-13WP050 | Intelliqube Tape, 384 well, 50 array reel | 7.15m |
BA 0372 | 5'-Click-easy™ BCN CE-Phosphoramidite I | 250mg |
BA0019-C001 | 5-Nitroindole CE-Phosphoramidite, 1 g, MerMade (30 mL / 28-400) | 1 g |
BA0129 | Puromycin CPG, 1000 ?, Standard Loading, 500 mg | 500mg |
BA0129-B500 | Puromycin CPG, 1000 ?, Standard Loading, 500 mg | ea |
BA0129-C000 | Puromycin CPG, 1000 ?, Standard Loading, BULK (g) | 1g |
BA0212-B250 | 3-Deaza-3-Me-dA CE-Phosphoramidite, 250 mg, ABI (10 mL / 20 mm Septum) | 250mg |
BA0309-F050 | Anthraquinone-5-Ethynyl-dU CE-Phosphoramidite, 50 µmol, ABI (5 mL / 20 mm Septum) | ea |
BA0353-B250 | 5-Ethynyl-Uridine CE-Phosphoramidite, 250 mg, ABI (10 mL / 20 mm Septum) | 250 mg |
BA0357-C000 | Tocopherol-TEG CE-Phosphoramidite, BULK (g), Glass Screw-Top | ea |
BA0370-F100 | 7-Deaza-7-Me-2'-dG CE-Phosphoramidite, 100umol, ABI (5 mL / 20 mm Septum) | 100umol |
BA0415-B250 | 2-Thiouridine CE-Phosphoramidite, 250 mg, ABI (10 mL / 20 mm Septum) | 250 mg |
BG1-1000-1 | 5'-DMT-dA(Bz)-Suc-CPG; 1000 ? | 1g |
BG1-2000-1 | Aminopropyl-CPG; 1000 ? | 1g |
BG1-5011-1 | C3 CPG (DMT-1,3-Propanediol-Suc-CPG); 1000 ? | 1g |
BG1-5013-1 | C6 CPG (DMT-1,6-Hexanediol-Glyc-CPG); 1000 ? | 1g |
BG2-2000-10 | Aminopropyl-CPG;2000 ? | 10g |
BG5-1300-10 | 5'-DMT-T-Suc-CPG; 500 ?, 10 g | 10g |
BG5-5041G-1 | BHQ-1 CPG; Glycolate, 500 ? | 1g |
BG5-5041G-100 | BHQ-1 CPG; Glycolate, 500 ? 100 mg | 100mg |
BG5-5042G-1 | BHQ-2 CPG; Glycolate, 500 ? | 1g |
BG5-5043G-1 | BHQ-3 CPG; Glycolate, 500 ? | 1g |
BG5-5043G-100 | BHQ-3 CPG; Glycolate, 500 ?, Standard Loading, 100 mg | 100mg |
BG7-0032-B | LCAA (CNA) CPG, 500 ?, Standard Loading | 1g |
BG7-0037-BULK-500g | LCAA (CNA) CPG, 1000 ?, Standard Loading, BULK (g) | 500g |
BG7-0041-B | LCAA (CNA) CPG, 2000 ?, Standard Loading, BULK (g) | 1g |
BHQ-1000S-25 | BHQ-1 Succinimidyl Ester | 25mg |
BHQ-1001-25 | BHQ-1 Amine | 25mg |
BHQ-2001-25 | BHQ-2 Amine | 25mg |
BHQ-3000S-5 | BHQ-3 Succinimidyl Ester | 5mg |
BL1030-F100 | BBQ-650™ (DMT) CE-Phosphoramidite | 100 umol |
BL3010-B005 | BBQ-650™-N-Hydroxysuccinimide Ester, 5 mg, Glass Screw-Top | ea |
BNS-5022-100 | Biotin C6 T Amidite (TBB) | 100umol |
BNS-5051-50 | BHQ-1 DMT亞磷酰胺 | 5mg |
BNS-5067-100 | Quasar 705 Amidite | 100 umol |
BNS-5067-50 | Quasar 705 Amidite, 50 µmol | 50umol |
BNS-5081-250 | CAL Fluor Orange 560 Amidite, 250 mg | 250mg |
BNS-5081-50 | CAL Fluor Orange 560 Amidite | 50umol |
BNS-5082-50 | CAL Fluor Red 610 Amidite | 50umol |
BNS-5084-250 | CAL Fluor Red 635 Amidite | 250mg |
BNS-6001-1 | 5-Nitroindole Amidite | 1gram |
BS0200 | 2ml外旋凍存管,50片/包,1000片/箱 | 1000片/箱 |
CDNJ-A14224000AL-100 | 氫可的 | 1ml |
D-5050-10 | DNP-BSA (Bovine Serum Albumin) | 10mg |
D-5050-100 | DNP-BSA (Bovine Serum Albumin) | ea |
D-5059-100 | DNP-HSA (Human Serum Albumin) | 100mg |
D-5060-5 | DNP-KLH (Keyhole Limpet Hemocyanin) | 5mg |
DB0715K | Baseline-ZERO DNase Complete DNA Digestion | 5000units |
DRE-A14224000ME-100 | 氫可的 | 1ml |
E3101K | Plasmid-Safe ATP-Dependent DNase | 1000 units |
F-1200-10 | DNP-AECM-FICOLL | 10mg |
F-1511-10 | Fluorescein-OVAL (Ovalbumin) | 10mg |
F83900-2 | NxGen phi29 DNA Polymerase, 10 U/µL, 50,000 U enzyme only | 50000 units |
G-1000-10 | N1-Guanyl-1,7-diaminoheptane (GC7) | 10mg |



