ZYMO Kanamycin Sulfate Solution

產(chǎn)品概述：

Kanamycin Sulfate Solution 是美國(guó) Zymo Research 原廠生產(chǎn)、即用型無菌硫酸卡那霉-素儲(chǔ)備液（RUO 科研專用），標(biāo)準(zhǔn)濃度 35 mg/mL，經(jīng) 0.2 μm 濾膜無菌過濾，有效成分純度≥98%。專為大腸桿菌質(zhì)粒、黏粒 Cosmid、BAC/PAC 大片段載體擴(kuò)增與陽性克隆篩選開發(fā)，省去自行稱量、溶解、除菌步驟，開瓶稀釋即可配制抗性培養(yǎng)基，是分子克隆、原核表達(dá)、基因組文庫(kù)構(gòu)建、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)主流篩選抗生素。

硫酸卡那霉-素屬于氨基糖苷類廣譜抗生素，通過結(jié)合細(xì)菌 70S 核糖體干擾 mRNA 翻譯，造成蛋白合成異常，對(duì)革蘭氏陽性、陰性菌均具備強(qiáng)抑制效果；攜帶kan抗性基因（編碼氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶）的菌株可修飾滅活卡那霉-素，從而在含卡那霉-素培養(yǎng)基上存活，以此完成重組載體陽性菌株篩選。

技術(shù)參數(shù):

使用流程:

l LB 液體 / 固體培養(yǎng)基高壓滅菌后冷卻至 40–50℃，高溫會(huì)降解卡那霉-素；

l 按 1:1167 比例添加儲(chǔ)備液（1L 培養(yǎng)基添加約 0.86 mL 35 mg/mL 母液，終濃度 30 μg/mL）；

l 充分混勻，固體培養(yǎng)基直接倒平板，液體培養(yǎng)基分裝使用；

l 卡那抗性平板 4℃避光密封保存，液體培養(yǎng)基建議現(xiàn)配現(xiàn)用；

l 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化、高拷貝質(zhì)粒擴(kuò)增可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求微調(diào)工作濃度。

產(chǎn)品訂購(gòu)：

應(yīng)用場(chǎng)景:

l 含 kan 抗性基因陽性克隆篩選：大腸桿菌轉(zhuǎn)化后涂布卡那霉-素平板，篩選重組質(zhì)粒、黏粒陽性菌落；

l BAC/PAC 大片段基因組文庫(kù)培養(yǎng)：維持大型載體穩(wěn)定傳代，防止載體丟失；

l 農(nóng)桿菌介導(dǎo)植物轉(zhuǎn)化：篩選攜帶 nptII 抗性基因的愈傷組織、植株；

l 多抗性載體雙 / 三重篩選：搭配氨芐青霉-素、氯霉-素進(jìn)行多標(biāo)記載體篩選；

l 原核蛋白表達(dá)菌株培養(yǎng)：維持表達(dá)質(zhì)粒穩(wěn)定，避免傳代丟失；

l 高通量質(zhì)粒庫(kù)、測(cè)序文庫(kù)大批量擴(kuò)增制備。

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